高效液相色谱仪的进样装置要求密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力和流量影响小。HPLC进样方式有隔膜进样、停流进样、阀进样和自动进样器进样等。

 

一、隔膜进样：

 

        用微量注射器将样品注入专门设计的与HPLC色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到色谱柱填充床的中心，死体积几乎等于零，可获得zui优柱效，且价格便宜，操作方便。但不能在高压下使用（如10MPa以上）；隔膜容易吸附样品产生记忆效应，使进样重复性只能达到1%～2%；能耐各种溶剂的橡皮不易找到，常规分析使用受到限制。

 

二、停流进样：

 

        可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新启动时往往会出现鬼峰；保留时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中，效果较好。

 

三、阀进样：

 

        HPLC分析常用六通阀，其关键部件由圆形密封垫（转子）和固定底座（定子）组成。由于阀接头和连接管死体积的存在，柱效低于隔膜进样（约下降5%～10%），但耐高压（35～40MPa），进样量准确，重复性好（0.5%），操作方便。

 

  1、六通阀进样方式：

 

      （1）部分装液法进样：

 

        进样时，进样量应不大于定量环体积的50%（zui多75%），要求每次进样体积准确、相同。

 

        此法进样的准确度和重复性决定于注射器取样的熟练程度，而且易产生由进样引起的峰展宽。

 

        （2）完全装液法进样：

 

        进样时，进样量应不小于定量环体积的5～10 倍（zui少3倍），这样才能完全置换定量环内的流动相，消除管壁效应，确保进样的准确度和重复性。

 

  2、六通阀使用和维护注意事项：

 

        （1）样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。

 

         （2）转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中间位置。否则流动相受阻，使泵内压力剧增，甚至超过泵的zui大压力，再转到进样位时，过高的压力将使色谱柱损坏。

 

          （3）为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。

 

四、自动进样器进样：

 

        用于大量样品的常规分析。